抗原制備及純化

抗原制備: 參照文獻(xiàn)［10］制備 MRJ 抗原。復(fù)蘇pET28a-mrj 轉(zhuǎn) Rosetta 菌0種 接 種 于 具 Kana抗 性 的10 mL液體培養(yǎng)基中的，37 ℃ 培養(yǎng)過夜，次日以 1∶ 50轉(zhuǎn)瓶進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，當(dāng)菌液 OD600達(dá) 0． 6時(shí)加入濃度為 5 mmol /L 的 IPTG，37 ℃ 誘導(dǎo) 8 h超聲碎裂后進(jìn)行考馬斯亮藍(lán)染色檢驗(yàn)，有目的蛋白的大量表達(dá)。抗原大量制備及純化: 以 5 × 10 -4 mol /L濃度的IPTG，37 ℃ 條件下大量誘導(dǎo)( 200 mL 菌液) 8 h 后收集樣品，CPG佐劑，超聲裂解后將所得 MRJ 蛋白過Ni-IDA 凝膠柱親和純化，考馬斯亮藍(lán)染色后檢測(cè)目的蛋白純度高于 90% ，可用于單克0隆抗0體制備動(dòng)物免0疫的抗原。

免0疫佐劑簡(jiǎn)稱佐劑，即非特異性免0疫增0生劑，指那 些同抗原一起或預(yù)先注入機(jī)體內(nèi)能增強(qiáng)機(jī)體 對(duì)抗原的免0疫應(yīng)答能力或改變免0疫應(yīng)答類型的輔助物質(zhì)。佐劑可以具有免0疫原性，也可無免0疫原性。佐劑種類很多，目前尚無統(tǒng)一的分類方法，應(yīng)用zui多的是弗氏佐劑和細(xì)胞0因子佐劑。佐劑的免0疫生物學(xué)作用是增強(qiáng)免0疫原性、增強(qiáng)抗0體的滴度、改變抗0體產(chǎn)生的類型、引起或增強(qiáng)遲發(fā)超敏反應(yīng)，但佐劑的作用機(jī)制尚未完全明了，不同佐劑作用的機(jī) 制也不盡相同。

DOI：搭建信息資源的橋梁

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