★★★★★    ★★★★★     上海酶研生物    ★★★★★       ★★★★★   

 

elisa 生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。

實(shí)驗(yàn)原理： 
 上海酶研生物試劑盒檢測(cè)方法有:雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法
試劑盒組成：

規(guī)格	96t		規(guī)格	48t
試劑盒組成			試劑盒組成
30倍濃縮洗滌液	20ml×1 瓶		20倍濃縮洗滌液	20ml×1 瓶
酶標(biāo)包被 板	12孔× 8 條		酶標(biāo)包被 板	12孔×4條
酶標(biāo)試劑	6ml× 1 瓶		酶標(biāo)試劑	3ml×1 瓶
樣品稀釋液	6ml× 1 瓶		樣品稀釋液	3ml×1 瓶
顯色劑a 液	6ml× 1 瓶		顯色劑a 液	3ml×1 瓶
顯色劑b 液	6ml× 1/ 瓶		顯色劑b 液	3ml×1/ 瓶
終止液	6ml× 1 瓶		終止液	3ml×1 瓶
標(biāo)準(zhǔn)品	0.5ml× 1 瓶		標(biāo)準(zhǔn)品	0.5ml× 1 瓶
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml× 1 瓶		標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml× 1 瓶
說明書	1份		說明書	1份
封板膜	2片（96）		封板膜	2片（48）
密封袋	1個(gè)		密封袋	1個(gè)

標(biāo)本要求 
1.血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2.血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇edta、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3.尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用pbs（ph7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的pbs，ph7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的pbs（ph7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測(cè)含nan3的樣品，因nan3抑制辣根過氧化物酶的（hrp）活性。
操作步驟

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2000pg/ml	5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1000pg/ml	4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
500pg/ml	3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
250pg/ml	2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125pg/ml	1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 

加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 

溫育：操作同3。

洗滌：操作同5。

顯色：每孔先加入顯色劑a50μl，再加入顯色劑b50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（od值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

操作程序總結(jié)：
計(jì)算
  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，od值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的od值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與od值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的od值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本od值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的od值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。 
保存條件及有效期 
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月
本說明書48t同樣適用 
上海酶研生物elisa試劑盒特點(diǎn)體現(xiàn)： 
       一、高效、靈敏、特異---采用全進(jìn)口材料和抗體
  二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性---領(lǐng)先的科技水平
  三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體---嚴(yán)格的生產(chǎn)流程和規(guī)范操作
酶研生物elisa試劑盒適用范圍： 
一．適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
二．可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚等
三．可檢測(cè)指標(biāo)齊全：白介素，干擾素，血管緊張素，肺炎衣原體，趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素 等等 指標(biāo)
酶研生物elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)： 
1.每個(gè)指標(biāo)需提供100微升樣品，如做復(fù)孔則200微升
 
2、標(biāo)本離心處理后請(qǐng)使用泡沫箱加冰袋郵寄至我司；
 
2、樣本在一周內(nèi)使用，保存條件2-8度；
 
3、代測(cè)服務(wù)只反饋實(shí)驗(yàn)結(jié)果原數(shù)據(jù)信息，不再提供相應(yīng)試劑盒；
 
4、需支付相應(yīng)試劑盒費(fèi)用，代測(cè)不產(chǎn)生任何費(fèi)用；
上海酶研生物科技有限公司坐落于上海閔行高科技園區(qū)，現(xiàn)擁有來自人、小鼠、大鼠、兔、豬等種屬的試劑盒5000余種，還可根據(jù)客戶要求定做試劑盒，提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。質(zhì)量好，使我們擁有源源不斷的客戶；價(jià)格低，薄利多銷是我們生存的優(yōu)勢(shì)?；服務(wù)好，讓我們?cè)跇I(yè)界擁有很好的口碑。我們將一如既往堅(jiān)持質(zhì)量第一，誠(chéng)信為本的理念。 ?感謝新老客戶的博愛?。?/strong> 
 
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