Top10感受態(tài)細(xì)胞
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Top10化學(xué)感受態(tài) |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本品為使用大腸桿菌Top10菌株制備的高效化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108 cfu/μgDNA以上，被廣泛用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、基因克隆等；可以使用藍(lán)白斑篩選（注：不需額外添加IPTG來(lái)誘導(dǎo)lacZ表達(dá)）。
產(chǎn)品組成
組分 | CC96105-01 | CC96105-02 | CC96105-03 |
Top10感受態(tài)細(xì)胞 | 10 × 100 μL | 100 × 100 μL | 定制 |
基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(StrR) endA1 nupG
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20℃或者液氮中保存。
產(chǎn)品特性
-屬于E.coli K12系列，可用于基因克隆等，菌株生長(zhǎng)速度較快；
-在進(jìn)行藍(lán)白斑篩選時(shí)，僅需在平板上預(yù)先涂布X-gal即可，無(wú)需添加IPTG；
-不可用于以T7RNA聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的蛋白表達(dá)。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒DNA殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化DNA加入到100μL感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30min；
3. 將離心管置于42℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激90s后，立刻置于冰浴中靜置2-3min；
4. 向離心管中加入900μL LB或SOC培養(yǎng)基（室溫或37℃預(yù)熱），然后置于37℃搖床復(fù)壯45min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化DNA的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化DNA后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保Zui高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
克隆感受態(tài)細(xì)胞
CRISPR-Cas12蛋白，HOLMES核酸快速檢測(cè)平臺(tái)，分子生物學(xué)試劑，感受態(tài)細(xì)胞，分子診斷解決方案
生物科技技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)研發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù)；分子生物學(xué)試劑盒的生產(chǎn)、銷(xiāo)售（憑許可證在有效期內(nèi)經(jīng)營(yíng)）。（依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目，經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)）
吐露港生物科技有限公司吐露港生物科技公司致力于為分子診斷提供創(chuàng)新型解決方案！公司首次發(fā)現(xiàn)CRISPR-Cas12蛋白具備高效的反式切割活性，并基于該酶的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)研發(fā)了“福爾摩斯/HOLMES”核酸快速檢測(cè)平臺(tái)技術(shù)（one-HOur Low-cost Multipurpose highly Efficient System）。相比于傳統(tǒng)的qPCR等分子診斷技術(shù)，基于CRISPR的HOLMES技術(shù)具備高靈敏、高特異、快速和低成本等優(yōu)勢(shì)。正因...