武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專門從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品，服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域

7.為什么有的試劑盒是采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法？

小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗1體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)生物素化抗1體上的結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的生物素化抗1體愈少，后的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激1素等ELISA測(cè)定多用此法。

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3. 洗滌

材料經(jīng)固定后，PBS或雙蒸水沖洗約3小時(shí)。（20，30，30，60）

4. 脫水

材料依次經(jīng)80%、90%、、各級(jí)乙醇溶液脫水，各30min

注意事項(xiàng)：

（1）脫水必須在有蓋的玻璃品中進(jìn)行，防止吸收空氣中的水分。

（2）在更換高一級(jí)的脫水劑時(shí)，1好不要移動(dòng)材料以免損壞，可用吸管吸出器皿中的脫水劑，再用吸水吸盡器皿內(nèi)剩余液，然后于皿中加入高一級(jí)脫水劑。

（3）在低濃度酒精中，每級(jí)停留不宜太長(zhǎng)，否則易使組織變軟，IgA ELISA試劑盒，助長(zhǎng)材料的解體。

（4）在高濃度或純酒精中，每級(jí)停留的時(shí)間也不宜太長(zhǎng)，否則會(huì)使組織變脆，影響切片。

（5）如需過夜，應(yīng)停留在80%酒精中。

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1.2.1　抗1體的結(jié)構(gòu)

抗1體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測(cè)定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個(gè)輕鏈（L）和兩個(gè)重鏈（H）的單體組成。Ig的輕鏈?zhǔn)窍嗤?，有κ（kappa）和λ（Lambda）兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ（gamma）鏈和μ（mu）鏈。

重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗1體而異，稱為可變區(qū)，分別用VH和VL表示。兩者構(gòu)成抗1體的抗原結(jié)合部位，只與相應(yīng)的抗原決定簇匹配，發(fā)生特異性結(jié)合，是抗1體專一性結(jié)合抗原的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。

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