一、食用菌母種培養(yǎng)基的滅菌方法

     在食用菌母種培養(yǎng)基制作中常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法，該法滅菌較為徹底，云南野生菌具體方法步驟及注意事項(xiàng)如下：

1.選鍋、加水

     選用手提式高壓蒸汽滅菌鍋，向滅菌鍋內(nèi)加水至水位標(biāo)記高度。注意：水不可過多也不可過少，過少易燒干，過多棉塞易受潮，引起雜菌污染。

2.裝入培養(yǎng)基

      把培養(yǎng)基有序豎直排放入滅菌鍋內(nèi)，留開通氣孔，并保證蒸汽流通。西南野生菌試管口和棉塞不能直接接觸鍋壁，上面要蓋2層報(bào)紙或1層防水油紙，防止鍋蓋下面的冷凝水打濕棉塞。

后均勻擰緊鍋蓋上的螺絲，防止漏氣。

3.加熱滅菌

     將裝入培養(yǎng)基的滅菌鍋放置在2-3千瓦的電爐上進(jìn)行加熱，當(dāng)壓力升至0.05兆帕?xí)r，打開放氣閥緩慢放氣，讓壓力降至零，再放氣10-15分鐘，當(dāng)有大量熱蒸汽排出時(shí)，關(guān)閉放氣閥升壓滅菌。

     當(dāng)壓力升至0.11-0.12兆帕?xí)r，開始計(jì)時(shí)，并調(diào)節(jié)火力大小，始終維持所需壓力30分鐘。

4.停止加熱，緩慢減壓

     在0.11-0.12兆帕壓力下．滅菌30分鐘后，停止加溫，待壓力自然下降到0時(shí)打開放氣閥，緩慢排出殘留蒸汽；然后打開鍋蓋，待熱蒸汽冷卻片刻后，取出滅菌物品。

      滅菌完后，若連續(xù)使用，應(yīng)注意補(bǔ)足水分后再用。彤菌堂菌湯包若暫時(shí)不用，應(yīng)排出鍋內(nèi)剩余水分，清理干凈，下次備用。

二、食用菌接種場(chǎng)所的消毒方法

     首先，將接種箱、接種室或者接種帳的衛(wèi)生打掃干凈；然后放入所有用具及母種培養(yǎng)基，用甲醛和高錳酸鉀熏蒸消毒。藥品用量為每立方米甲醛10毫升，高錳酸鉀5克。

     熏蒸后的接種箱、接種室或者接種帳還可用紫外線輔助殺菌，一般10立方米的空間，用30瓦的紫外線燈照射30分鐘，待臭氧散去，即可開始接種。

      若采用超凈工作臺(tái)接種，野生菌批發(fā)首先要將超凈工作臺(tái)用清潔的水和干凈的抹布擦洗干凈，然后再用75%的酒精擦拭，放入接種用具和母種培養(yǎng)基，開機(jī)吹無菌風(fēng)30分鐘。

三、食用菌菌種消毒后的培養(yǎng)

     通過加溫、通風(fēng)、灑水、遮光等方法，保持培養(yǎng)室（箱）溫度20℃-24℃；空氣相對(duì)濕度在60%左右；暗光；空氣新鮮，促使菌絲健壯生長(zhǎng)。經(jīng)2-3天，即可在接種塊上萌發(fā)出大量菌絲，經(jīng)7-10天即可長(zhǎng)滿培養(yǎng)基斜面。

      在培養(yǎng)期間每隔2-3天檢查一次菌絲生長(zhǎng)情況，食用菌品牌若發(fā)現(xiàn)有雜菌污染或生長(zhǎng)不正常的試管，立即挑出并淘汰。

      長(zhǎng)滿的菌種可用于進(jìn)一步擴(kuò)繁，若暫時(shí)不用可放置在20℃-40℃的冰箱中冷藏備用。