凝血與纖溶系統(tǒng)的平衡對生命健康至關(guān)重要，從深靜脈血栓形成到肺栓塞，再到惡性腫瘤和妊娠期并發(fā)癥，凝血紊亂陰影無處不在。

    不少國內(nèi)IVD企業(yè)向久順企管咨詢，表現(xiàn)出對D-二聚體產(chǎn)品的濃厚興趣，有意申請IVDR，而一份符合IVDR要求的產(chǎn)品說明書是項目啟動的關(guān)鍵！盡管如此，查閱眾多制造商提供的說明書(不乏大型企業(yè))，發(fā)現(xiàn)大多編寫得過于簡單而無法達到IVDR要求。

    本期以D-二聚體產(chǎn)品為例，久順特別整理其說明書編寫要求分享如下。

標(biāo)志物

D-二聚體，一種由交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)生的特定標(biāo)志物，成為臨床的檢測指標(biāo)，不僅能反映血栓形成的風(fēng)險，還能指導(dǎo)抗凝治療策略，甚至預(yù)測某些疾病的預(yù)后。

適應(yīng)癥

· 排除靜脈血栓(VTE)尤其深靜脈血栓和肺栓塞；

· VTE復(fù)發(fā)的預(yù)測及危險分層；

· 疑似彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)時對凝血活性物質(zhì)的診斷和監(jiān)測；

· 懷疑先兆子癇。

臨床應(yīng)用

· 靜脈血栓栓塞癥VTE：D-二聚體水平升高是深靜脈血栓（DVT）和肺栓塞（PE）的常見指標(biāo)。疑似VTE患者中，高敏感度D-二聚體檢測可提高陰性預(yù)測值，有助排除VTE可能性。

· 急性冠脈綜合征ACS：在急性心肌梗死或不穩(wěn)定型心絞痛患者中，D-二聚體水平可能升高，因為其反映血栓形成和冠狀動脈內(nèi)凝血活動增加。

· 彌散性血管內(nèi)凝血DIC：全身性凝血和纖溶激活的病理狀態(tài)，可能導(dǎo)致多器官功能障礙。D-二聚體水平的顯著升高可能提示DIC存在。

· 腫瘤相關(guān)血栓形成：某些腫瘤患者尤其是與高凝狀態(tài)相關(guān)腫瘤，可能會有較高的D-二聚體水平，可能與腫瘤細胞表達的組織因子和其他促凝血因子有關(guān)。

· 妊娠期血栓風(fēng)險：妊娠期間由于生理性凝血因子水平變化，D-二聚體水平可能升高。某些情況下D-二聚體水平升高可能與妊娠期血栓形成風(fēng)險增加有關(guān)。

· 炎癥性疾?。耗承┭装Y性疾病，如炎癥性腸病或系統(tǒng)性紅斑狼瘡，可能導(dǎo)致D-二聚體水平升高，因為此疾病可能伴有凝血系統(tǒng)激活。

· 外科手術(shù)后：由于組織損傷和炎癥反應(yīng)，D-二聚體水平可能暫時升高。

· 創(chuàng)傷和重癥患者：嚴(yán)重創(chuàng)傷或重癥患者可能因為組織損傷、手術(shù)和炎癥反應(yīng)而導(dǎo)致D-二聚體水平升高。

實驗室檢測方法

· 全血凝集檢測法：使用單克隆抗體識別全血或血漿中的D-二聚體表位。

· 酶聯(lián)免疫吸附法：通過酶標(biāo)記的抗體與D-二聚體結(jié)合，產(chǎn)生可檢測信號。

· 酶聯(lián)免疫熒光法：使用熒光標(biāo)記的抗體，通過熒光強度定量D-二聚體。

· 乳膠增強免疫比濁法：利用乳膠顆粒增強免疫反應(yīng)，通過濁度變化檢測D-二聚體。

· 化學(xué)發(fā)光法：通過化學(xué)發(fā)光反應(yīng)檢測和定量D-二聚體。

關(guān)注:歐美/日本等主流產(chǎn)品均基于乳膠免疫比濁法,也稱微粒凝集定量檢測。

參考區(qū)間

多數(shù)研究統(tǒng)計表明正常人群D-二聚體數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，通常采用百分位數(shù)法，由于增高為異常，因此采用90%或95%上側(cè)界值。

配套檢測系統(tǒng)通常給出參考區(qū)間，但是由于地域、人群等差異，可能導(dǎo)致不適用，因而實驗室應(yīng)進行20份健康人群的驗證工作。

驗證不通過則再進行第二次驗證，如果連續(xù)兩次驗證不通過，此時需制定當(dāng)?shù)貙嶒炇覅⒖紖^(qū)間，至少檢測120份健康人群，以計算參考區(qū)間(18-60歲人群)，≥60歲老年人群中需進行(年齡×10)調(diào)整，參考區(qū)間也不適用妊娠期，可參考相應(yīng)文獻進行簡單驗證。

單 位

· 纖維蛋白原等價單位(Fibrinogen E,FEU):基于纖維蛋白原的相對分子質(zhì)量與D-二聚體的相對分子質(zhì)量之比計算的單位。

· D-二聚體單位(D-dimerUnit,DDU):直接基于D-二聚體的量進行報告的單位。實際應(yīng)用中生產(chǎn)廠家通常會在配套試劑說明書中說明本試劑盒報告方式。實驗室在報告D-二聚體結(jié)果時，應(yīng)選擇廠家推薦方式報告并在報告單明確標(biāo)注。

· 為方便臨床應(yīng)用和國際交流，推薦使用**微克每升(μg/L)或毫克每升(mg/L)**作為D-二聚體計量單位。

樣本處理與分析影響因素標(biāo)志物

D-二聚體檢測受眾多因素影響，遇到可疑或與患者臨床表現(xiàn)不符的結(jié)果時，應(yīng)綜合考慮檢驗前、中、后的潛在影響因素。

1. 樣本采集

可使用血漿或全血樣本進行D-二聚體檢測。CLSI和WHO推薦采用含3.2%檸檬酸鈉的抗凝血漿進行D-二聚體檢測，血液與抗凝劑比例9:1。

2. 樣本運送和處理

樣本應(yīng)在室溫環(huán)境15-22℃下、盡可能短時間內(nèi)(通常<1h)轉(zhuǎn)運至實驗室，樣本測試前可于室溫或4℃保存24h。

3. 分析干擾物質(zhì)

·現(xiàn)有研究大多未發(fā)現(xiàn)一般程度的脂血、黃疸對D-二聚體檢測有明顯影響，但這些研究多基于某個特定檢測系統(tǒng)，不能代表所有檢測系統(tǒng)。

·類風(fēng)濕因子可與檢測試劑中的D-二聚體單克隆抗體結(jié)合，導(dǎo)致D-二聚體假性升高。

·風(fēng)疹、帶狀皰疹等病毒感染后可引起機體產(chǎn)生嗜異性抗體，使基于免疫法檢測所得D-二聚體結(jié)果假性升高。

·副蛋白血癥(如多發(fā)性骨髓瘤\意義未明單克隆免疫球蛋白血癥)可能導(dǎo)致D-二聚體假陽性,但副蛋白對D-二聚體檢測影響存在個體差異,某些患者體內(nèi)副蛋白對特定制造商的抗體有特異性干擾。

·多種生理狀態(tài)及藥物使用均可出現(xiàn)D-二聚體升高。生理因素包括高齡、妊娠、劇烈運動后，藥物因素包括應(yīng)用血凝酶類藥、降纖藥、溶栓藥、粒細胞集落刺激因子等。

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