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武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專(zhuān)門(mén)從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品,服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。



 雙抗1體夾心法是檢測(cè)抗原1常用的方法,操作步驟如下:

  1)將特異性抗1體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗1體。洗滌除去未結(jié)合的抗1體及雜質(zhì)。

  2)加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗1體結(jié)合,形成固相抗原抗1體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。

  3)加酶標(biāo)抗1體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗1體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗1體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。



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3、  細(xì)胞培養(yǎng)上清

取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì),elisa,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

4、  細(xì)胞裂解液

1)  吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用胰酶消化細(xì)胞,加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來(lái)。懸浮細(xì)胞可省略。

2)  收集細(xì)胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。

3) 加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑1制劑)重懸細(xì)胞。通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需要150~250μLPBS重懸。



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假使在被測(cè)分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對(duì)此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測(cè)中應(yīng)注意亞型問(wèn)題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個(gè)亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問(wèn)題。

  雙抗1體夾心法測(cè)抗原的另一注意點(diǎn)是類(lèi)風(fēng)1濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗1體,多為IgM型,能和多種動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗1體夾心法檢測(cè)的血1清標(biāo)本中如含有RF,它可充當(dāng)抗原成份,同時(shí)與固相抗1體和酶標(biāo)抗1體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽(yáng)性反應(yīng)。采用F(ab")或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗1體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類(lèi)試劑的一項(xiàng)考核指標(biāo)(參見(jiàn)6.2)。

  雙抗1體夾心法適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,但不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。



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更新時(shí)間
統(tǒng)一社會(huì)信用代碼
91420100MA4KN1481C
成立日期
2016年06月30日
法定代表人
蔣軍

主營(yíng)產(chǎn)品

ELISA試劑盒,生化試劑等

經(jīng)營(yíng)范圍

生物產(chǎn)品技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)换ぎa(chǎn)品(不含危險(xiǎn)品)、儀表儀器、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、環(huán)保設(shè)備、玻璃制品、橡膠制品

公司簡(jiǎn)介

武漢默沙克生物科技有限公司是一家專(zhuān)門(mén)從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免1疫學(xué)試劑盒、生化試劑、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品,服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免1疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。企業(yè)擁有一支由檢驗(yàn)、生命科學(xué)、化工等專(zhuān)業(yè)人才組成的集研發(fā)生產(chǎn)、銷(xiāo)售管理和技術(shù)服務(wù)于一體的核心團(tuán)隊(duì),建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設(shè)備,并與高校、研究機(jī)構(gòu)、重點(diǎn)企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關(guān)系。企業(yè)研發(fā)生產(chǎn)的產(chǎn)品在免1疫、分子生物等多個(gè)領(lǐng)域得到...

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