牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基-國模麗麗啪啪一區(qū)二區(qū)メイリン モデルコレクション メ,國產(chǎn)精品歐美日韓在線觀看,應(yīng)用十分廣泛的天然培養(yǎng)基，其中的牛肉膏為微生物提供碳源、磷酸鹽和維生素，蛋白胨主要提供氮源和維生素，而nacl提供無機(jī)鹽

　　牛肉膏 0.3g

　　蛋白胨 1g

　　氯化鈉 0.5g

　　瓊脂 2g

　　自來水 100ml

　　ph 7.0～7.2

     滅菌 1.05kg/cm2，22min

配制具體步驟

1．稱量

　　按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取牛肉膏、蛋白胨、nacl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯。也可放在稱量紙上，稱量后直接放入水中，這時(shí)如稍微加熱，牛肉膏便會與稱量紙分離，然后立即取出紙片。蛋白胨很易吸潮，在稱取時(shí)動作要迅速。另外，稱藥品時(shí)嚴(yán)防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。

2．溶化

　　在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。待藥品完全溶解后，補(bǔ)充水分到所需的總體積。如果配制固體培養(yǎng)基，將稱好的瓊脂放入已溶化的藥品中，再加熱溶化，在瓊脂溶化的過程中，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底使燒杯破裂。Zui后補(bǔ)足所失的水分。

3．調(diào)ph

　　在未調(diào)ph前，先用精密ph試紙測量培養(yǎng)基的原始ph值，如果ph偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入1mol/l naoh，邊加邊攪拌，并隨時(shí)用ph試紙測其ph值，直至ph達(dá)7．6。反之，則用1mol/l hcl進(jìn)行調(diào)節(jié)。注意ph值不要調(diào)過頭，以避免回調(diào)，否則，將會影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。 　　對于有些要求ph值較的微生物，其ph的調(diào)節(jié)可用酸度計(jì)進(jìn)行（使用方法，可參考有關(guān)說明書）。

4．過濾

　　趁熱用濾紙或多層紗布過濾，以利結(jié)果的觀察。一般無特殊要求的情況下，這一步可以省去（本實(shí)驗(yàn)無需過濾）。

5．分裝

　　按實(shí)驗(yàn)要求，可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝裝置見圖ⅴ-1。 　　分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。 　　(1)液體分裝分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。 　　(2)固體分裝分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，如圖ⅴ-2。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。 　　(3)半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。

6．加塞

　　培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)而造成污染，并保證有良好的通氣性能（棉塞制作方法附本實(shí)驗(yàn)后面）。

7．包扎

　　加塞后，將全部試管用麻繩捆扎好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道麻繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期。三角燒瓶加塞后，外包牛皮紙，用麻繩以活結(jié)形式扎好，使用時(shí)容易解開，同樣用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期。

8．滅菌

　　將上述培養(yǎng)基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃， 20分鐘高壓蒸汽滅菌。如因特殊情況不能及時(shí)滅菌，則應(yīng)放入冰箱內(nèi)暫存。

9．?dāng)R置斜面

　　將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50℃左右，將試管棉塞端擱在玻棒上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。

10．無菌檢查

　　將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。 配制具體步驟

1．稱量

　　按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取牛肉膏、蛋白胨、nacl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯。也可放在稱量紙上，稱量后直接放入水中，這時(shí)如稍微加熱，牛肉膏便會與稱量紙分離，然后立即取出紙片。蛋白胨很易吸潮，在稱取時(shí)動作要迅速。另外，稱藥品時(shí)嚴(yán)防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。

2．溶化

　　在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。待藥品完全溶解后，補(bǔ)充水分到所需的總體積。如果配制固體培養(yǎng)基，將稱好的瓊脂放入已溶化的藥品中，再加熱溶化，在瓊脂溶化的過程中，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底使燒杯破裂。Zui后補(bǔ)足所失的水分。

3．調(diào)ph

　　在未調(diào)ph前，先用精密ph試紙測量培養(yǎng)基的原始ph值，如果ph偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入1mol/l naoh，邊加邊攪拌，并隨時(shí)用ph試紙測其ph值，直至ph達(dá)7．6。反之，則用1mol/l hcl進(jìn)行調(diào)節(jié)。注意ph值不要調(diào)過頭，以避免回調(diào)，否則，將會影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。

　　對于有些要求ph值較的微生物，其ph的調(diào)節(jié)可用酸度計(jì)進(jìn)行（使用方法，可參考有關(guān)說明書）。

4．過濾

　　趁熱用濾紙或多層紗布過濾，以利結(jié)果的觀察。一般無特殊要求的情況下，這一步可以省去（本實(shí)驗(yàn)無需過濾）。

5．分裝

　　按實(shí)驗(yàn)要求，可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝裝置見圖ⅴ-1。

　　分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。

　　(1)液體分裝分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。

　　(2)固體分裝分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，如圖ⅴ-2。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。

　　(3)半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。

6．加塞

　　培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)而造成污染，并保證有良好的通氣性能（棉塞制作方法附本實(shí)驗(yàn)后面）。

7．包扎

　　加塞后，將全部試管用麻繩捆扎好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時(shí)冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道麻繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期。三角燒瓶加塞后，外包牛皮紙，用麻繩以活結(jié)形式扎好，使用時(shí)容易解開，同樣用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期。

8．滅菌

　　將上述培養(yǎng)基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃， 20分鐘高壓蒸汽滅菌。如因特殊情況不能及時(shí)滅菌，則應(yīng)放入冰箱內(nèi)暫存。

9．?dāng)R置斜面

　　將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50℃左右，將試管棉塞端擱在玻棒上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。

10．無菌檢查

　　將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。