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一文了解親和層析柱裝柱注意事項
1.洗脫
親和層析的另一個重要的步驟就是要選擇合適的條件使待分離物質(zhì)與配體分開而被洗脫出來。親和層析的洗脫方法可以分為兩種:特異性洗脫和非特異性洗脫。
(1)特異性洗脫
特異性洗脫是指利用洗脫液中的物質(zhì)與待分離物質(zhì)或與配體的親和特性而將待分離物質(zhì)從親和吸附劑上洗脫下來。
特異性洗脫也可以分為兩種:一種是選擇與配體有親和力的物質(zhì)進行洗脫,另一種是選擇與待分離物質(zhì)有親和力的物質(zhì)進行洗脫。前者在洗脫時,選擇一種和配體親和力較強的物質(zhì)加入洗脫液,這種物質(zhì)與待分離物質(zhì)競爭對配體的結(jié)合,在適當?shù)臈l件下,如這種物質(zhì)與配體的親和力強或濃度較大,樹脂柱規(guī)格,配體就會基本被這種物質(zhì)占據(jù),原來與配體結(jié)合的待分離物質(zhì)被取代而脫離配體,從而被洗脫下來。
例如用凝集素作為配體分離糖蛋白時,可以用適當?shù)膯翁窍疵?,單糖與糖蛋白競爭對凝集素的結(jié)合,可以將糖蛋白從凝集素上置換下來。
大孔吸附樹脂的分類
根據(jù)樹脂極性的不同,大孔吸附樹脂可以分為非極性、中極性、極性和強極性四類.
非極性吸附樹脂是由偶極距很小的單體聚合而成,不含任何功能基團,表面的疏水性較強,可通過與有機物的疏水部分作用而吸附溶液中的有機物,適合于從極性溶劑(如水)中吸附非極性物質(zhì)。
中極性吸附樹脂含有酯基,其表面兼有疏水和親水部分,既可從極性溶劑中吸附非極性物質(zhì),也可從非極性溶劑中吸附極性物質(zhì)。
極性和強極性吸附樹脂一般通過靜電作用吸附極性物質(zhì)。
一般陽離子交換樹脂都是氫離子型,這樣的話就用1~2%的稀硫酸浸泡,時間12小時或以上,再用水洗至中性,即可使用。不能用自來水洗,要有去離子水,樹脂的ph一般不測定,測的是通過樹脂流出來的溶液的ph。
由于在合成樹脂過程中,樹脂表面及空隙中混摻有低分子和一些無機雜質(zhì)(如銅、鐵等)、高分子單體物質(zhì),樹脂柱,以及致孔劑等,因此樹脂在正式投入運行之前,必須將這些雜質(zhì)除去,樹脂柱廠家,否則在使用過程中會以各種方式污染樹脂。特別應(yīng)當指出,在含鉻廢水中,因鉻酸是一種氧化劑,如樹脂中有銅、鐵,便有催化氧化作用,樹脂柱供應(yīng),從而加快樹脂氧化。預(yù)處理方法如下:1、熱水洗滌準備使用的新樹脂先用熱水反復(fù)清洗。陽樹脂可用70~80℃的熱水,陰樹脂(特別是強堿陰樹脂)的耐熱性較差,可用50~60℃的熱水。開始浸洗時,每隔15分鐘左右換水一次,浸洗時要不是攪拌,換水4~5次后,可隔30分鐘左右換水一次,總共換水7~8次,浸泡至洗滌水不帶褐色,泡沫很少時為止。
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