產(chǎn)品簡介

Stbl3菌株來源于大腸桿菌HB101菌株，是慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株?；蚪M帶有重組酶recA13突變，可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但由于菌株不含核酸酶endA1突變，因此體內(nèi)核酸酶含量較高，在提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中的去蛋白液進(jìn)行處理，否則抽提出的質(zhì)粒很不穩(wěn)定，易降解。此菌株具有鏈霉素抗性，不存在lacIqZΔM15，不可用于藍(lán)/白斑篩選實驗。經(jīng)pUC18轉(zhuǎn)化檢測，Stbl3感受態(tài)細(xì)胞的效率可達(dá)108cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

CC96134-01

CC96134-02

CC96134-03

Stbl3化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100μL

100 × 100  μL

定制

基因型：F- mcrB mrrhsdS20(rB- mB-)recA13 supE44 ara-14 galK2lacY1 proA2 rpsL20 (StrR)xyl-5 λ- leu mtl-1endA1+

存儲條件

-80℃保存；請勿將本品置于-20℃或者液氮中保存。

產(chǎn)品特性

-屬于大腸桿菌K株系列，主要用于目標(biāo)基因的克隆和質(zhì)粒的保存；不可用于以T7RNA聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的蛋白表達(dá)；

-該菌株適合克隆不穩(wěn)定插入片段，甲基化的基因組序列，以及慢病毒載體的構(gòu)建。

質(zhì)量控制

無外源質(zhì)粒DNA殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1.將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃中取出，置于冰浴中融化；

2.將待轉(zhuǎn)化DNA加入到100μL感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30min；

3.將離心管置于42℃水浴鍋中，不要晃動，熱激90s后，立刻置于冰浴中靜置2-3min；

4.向離心管中加入900μL LB或SOC培養(yǎng)基（室溫或37℃預(yù)熱），然后置于37℃搖床復(fù)壯45min；

5.取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1.感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2.加入的待轉(zhuǎn)化DNA的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10；

3.加入待轉(zhuǎn)化DNA后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4.為確保Zui高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。